NY 882-2004 硅酸盐细菌菌种(农业)
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ID： |
60D5A3CED15E41B48C6F6C3003ECD4CB |
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文件大小(MB)： |
1.32 |
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页数： |
11 |
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文件格式： |
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日期： |
2021-12-23 |
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ICS 65.080,B 10,中华人民共和国农业行业标准,NY 882-20ω,硅酸盐细菌菌种,Silicate-Dissolving bacteria culture,2005-01-04 发布2005-02-01 实施,中华人民共和国农业部发布,NY 882-2004,I,-E,本标准的附录A 、附录B 、附录C、附录D 和附录E 为规范性附录,本标准由中华人民共和国农业部提出并归口,本标准起草单位:农业部微生物肥料质量监督检验测试中心,本标准主要起草人:曹凤明、李俊、沈德龙、姜昕、葛一凡,前,NY 882- 2004,硅酸盐细菌菌种,范围,本标准规范了农用硅酸盐细菌菌种的特征、要求、检验方法、评价方法以及菌种的纯化、复壮和保,藏,本标准适用于农用微生物菌剂和微生物肥料生产中使用的硅酸盐细菌菌种,2 规范性引用文件,下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有,的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准， 然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究,是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准,NY/T 798-20ω 复合微生物肥料,GB/T 17419- 1998 含氨基酸叶面肥料,NY/T 301- 1995 有机肥料速效梆的测定,3 术语,硅E量盐细菌菌种Silicate-DisωIving Bacteria Culture,是指一类在土壤中能通过自身的生命活动，分解硅铝酸盐类矿物，释放饵索营养，改善植物的营养,条件，并具备生产应用性能的细菌纯培养物,4 菌种特征,硅酸盐细菌菌种包括胶质芽抱杆菌( Bacill us mucílaginosus) 和土壤芽抱杆菌( Bacillus eda户hicllS),两个种,4. 1 细胞形态,营养体粗长杆状，两端钝圆，革兰氏染色反应不定，产生聚R 经基丁酸盐( PHB ) 颗粒。在瑞养基,A. l 上( 参见附录A)菌体大小为( 1. 0 - 1. 2 ) μm X ( 2 . 5 - 7 . 0 ) μm ，菌体周围有厚英膜,芽泡:壁厚，椭圆形， 中生或近端生，芽泡囊不膨大或微膨大,4.2 菌落形态,在A .l 培养基平板上， 菌落圆形，元色，隆起， 胶质和稠，透明或半透明， 边缘整齐,4.3 生物学特征,好氧或兼性厌氧生长，水解淀粉，接触酶反应阳性，氧化酶和卵磷脂酶反应阴性，在元氮培养基(参,见附录A.2)上生长良好，生长温度10 'c - 45 'c ,5,5. 1,5.2,要求,菌种要求纯培养物.无杂菌,硅酸盐细菌菌种技术指标见表I ,NY 882-2004,表1 硅酸盐细菌菌种技术指标,项目指标,解何能力速效柳相对增加量， % 二注20,发醉植物激素且量. mglL 二三1.0,代由t 游离氨基酸且盐， 吨IL 二注50 ,0,产物有机酸总量， mglL 二主500 ,0,耐热能力芽抱存活率， 锁， 二主70,发酵周期， h s豆ω,6 检验方法,6. 1 菌种纯度检验,在适宜培养基上培养，观察菌落和菌体形态，若有杂菌丢弃或对其进行纯化，纯化方法见8 . 1. 2 ,6.2 解饵能力的测定,速效例相对增加量的测定方法见附录B,6.3 发酵代谢产物测定,6.3. 1 发酶条件,在适宜培养条件下， 发酵周期结束后取样测定发酵液中代谢产物的含量。以不接种的发酵培养液,作对照。发酵培养基见附录A .3,6.3.2 植物激素的测定,见附录C,6.3.3 游离氨基峻的测定,见附录D,6.3.4 有机酸的测定,见附录E,6.4 芽抱存活率测定,6.4.1 iJ!~定方法,菌悬液在65t 条件下恒温30 min 杀死营养体，制成芽抱悬液。芽抱悬液于80t 恒温水浴处理10,mm ，将处理前和处理后的芽抱悬液稀释涂布在适宜培养基上，适宜条件下培养2 d- 4 d ，计菌落数。3,次重复。活菌数测定方法按NYíf 798-2004 复合微生物肥料中5.3 . 2 的要求进行,6.4.2 芽抱存活率计算,按式( I )讨算,式中-,a 一-芽于包存活率( %) ;,a( %) = 主x 1 00 . ..…, (J),",n o一一处理前芽抱悬液的菌落平均数( cfu /mL) ;,llJ 处理后芽抱悬液的菌落平均数(cfu /mL ) ,65 发醉周期的检验,适宜生产条件下，当发酵液中的菌体数量达到10' cfu /mL 以上且有80% 以上的营养体形成芽抱为,2,NY 882-2004,发酵周期终止,7 评价方法,7. 1 菌株符合表l 中的各项指标，可以作为优良生产商株,7 .2 表1 中其他三项符合要求，而发酵代谢产物仅两项达到要求或其中→项达到要求的两倍，也可作,为生产菌株,7.3 当硅酸盐细菌菌种用做生产液体剂型时，对耐热能力不做要求,8 菌种纯化、复壮和保藏,8 1 菌种分离与纯化,8. 1. 1 分离,将土壤或其他样品和j成菌悬液，稀释后涂布A.l 培养基平板上，适宜条件下培养2 d - 4 d ，挑取符,合硅酸盐细菌菌种特征的菌落进行纯化,8. 1 .2 纯化,在适宜的培养基上连续划线培养观察， 直至商落形态一致，镜检菌体大小整齐、元杂菌,根据硅酸盐细菌的特征进行菌种确认,8.2 复壮,菌种生长速度下降、菌体形态出现异常、主要功能指标下降时需要进行菌种复壮,具体操作方法是将菌种接种在适宜的土壤或载体中，也可将菌种转接在含有土壤浸出液的培养基,上2 - 3 代，培养一段时间后再分离，挑取与原菌种特征}致的菌落，纯化，同时按表1 中的要……
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